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    台北市音樂補習班教師生涯發展之研究
    (2007) 李嘉雯; Li Chia-Wen
    本研究旨在了解任職於台北市音樂補習班教師之生涯發展狀況及其形成因素,研究問題針對音樂補習班教師的生涯發展狀況分為四個面向進行探討,包括教師個人特質、學習經驗、工作經歷以及家庭生活。研究者採用訪談方式,訪談六位現在任職於音樂補習班之教師,具體結論如下: (一)有關教師個人特質方面 研究發現,「耐心」、「熱忱」是受訪者們一致認為身為音樂補習班教師比一般教師更必須具備的重要特質。教師的個人特質同時影響教學態度以及受訪者們對於進修規劃的看法。 (二)有關教師學習經驗方面 研究發現,在不同專業背景下的教師們,對於國內音樂教育的看法相當一致,認為國內音樂資優教育,仍以培養演奏人才為主,因此學歷以及不同的專業養成背景,在此職場的生涯發展上沒有影響或明顯之差異。 (三)有關教師工作經歷方面 研究發現,「家長」、「學生」以及「薪資」為受訪者工作經歷中最主要的形成因素,在其他部分中,「行政人員」對教師專業的尊重與「經營者」是否過度商業取向而塑造出商業氣息過於濃厚的工作環境,亦成為影響教師們去業或留業的決定性因素;而學歷的高低進而影響職場中薪資的配給。 (四)有關教師家庭生活方面 研究發現,無論是已婚教師或者未婚教師,在生涯發展的規劃時,均會考慮到「婚姻」變項,因此,婚姻生活狀況確實會影響教師們在生涯發展上的方向。 (五)各個因素皆會產生交互影響,在整個生涯發展中形成一個循環的歷程。 研究發現,每一個因素均是環環相扣的,有時是一個循環的歷程,有時則是時間動態性的變化所得的,有時候是許多因素相互作用而造成的結果。 依據研究結論,研究者針對未來有志投入音樂補習班之職場者、教育相關行政單位以及後續研究等,提出建議,作為音樂教室教師們未來生涯發展與有志投入此職場之教師們之參考。 關鍵字:音樂補習班、教師生涯發展
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    水稻 (Oryza sativa L.) 第三型幾丁質酶的分子研究
    (2006) 李嘉雯; Chia-Wen Li
    我們自水稻懸浮培養細胞所分泌的蛋白質當中,鑑定出兩種第三型的幾丁質酶 (Osm30和Osm34)。本研究不但針對這兩種幾丁質酶進行生化特性與生理功能的探討,也就水稻基因組資料庫中的32個第三型幾丁質酶成員,進行親緣系統樹的分析,結果顯示Osm30及Osm34分別歸類為第IIIa和IIIb亞型。 幾丁質酶屬於pathogenesis-relative (PR) 蛋白質家族成員,常參與植物的抗病防禦機制。當水稻細胞受到四種病原真菌:Rhizoctonia solani、Sarocladium oryzae、Gibberella fujikuroi和Bipolaris oryzae的感染時,Osm30和Osm34的表現量,均會被誘導增加。此外,Osm30和Osm34也受到甲基茉莉酸 (MeJA) 處理的誘導,而水楊酸 (SA) 的處理則不影響兩者基因的表現,顯示此兩種第三型幾丁質酶可能是經由JA/ethylene-dependent訊息傳導路徑,而非以SA-dependent路徑,來參與植物的抗病機制。 本研究培養水稻細胞的過程中也發現,每當更換新培養液後,水稻細胞的Osm30和Osm34基因都會被短暫誘導而增加表現,隨後又降回基礎表現量。此暫時性表現的情形可能受到繼代培養的攪拌動作 (agitation),及更換新舊培養液時產生的滲透壓差的正向調控;此外,水稻細胞在培養過程中,會新生成並分泌一些抑制幾丁質酶表現的成分,以調節Osm34基因的表現。當水稻細胞以與逆境有關的植物生長調節劑ABA處理時,結果顯示其對於Osm30為正向的促進表現,對Osm34卻為負向的抑制表現,顯示此兩個幾丁質酶在不同的逆境下,其基因表現的調控機制可能有所不同。 綜合上述資料,Osm30和Osm34幾丁質酶在水稻細胞內平常只有基礎量的表現,當細胞感受到環境的變化,包括滲透勢改變、受到機械傷害或病原菌感染時,可能經由JA/ethylene訊息路徑,和/或由其他未知的因子,來調控共同調控其基因的表現,當水稻細胞已適應環境或威脅去除後,水稻細胞有另外的機制來節制幾丁質酶基因的表現。
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    水稻(Oryza Sativa L.) Osm30分泌性蛋白質的生化及功能分析--一種第三型的幾丁質酶
    (國立臺灣師範大學生命科學學系, 2006-06-??) 李嘉雯; 王玉麒
    本研究自水稻的懸浮細胞培養液中,分離出一分子量為30kDa,且具有水解glycol chitin活性之蛋白質(Osm30)。經由蛋白質N端胺基酸微定序分析及基因選殖的結果顯示,Osm30為水稻的第III型幾丁質酶家族的一員。將Osm30基因轉形並表現於大腸桿菌峙,可觀察到細菌生長被抑制的情形,推測Osm30可能具有溶菌酶的活性。在水稻細胞懸浮培養的過程中,Osm30的mRNA會因繼代培養而有暫時性增加表現的情形,但其在細胞內的蛋白質含量則相對穩定,而在培養液中,Osm30蛋白質則是隨著培養天數增加而持續累積,顯示Osm30蛋白質具有高度穩定性。當以四種 病原真菌,包括:Rhizoctonia solani、Sarocladium oryzae、Gibberella fujikuroi和Bipolaris oryzae,成染水稻細胞時,均會誘導增加Osm30的表現量,顯示Osm30可能在水稻的抗菌防禦機制中扮演相關角色。甲基茉莉酸(MeJA)、離層酸(ABA)和水楊酸(SA)為已知和植物防禦機制有關的生長調節劑,當以這些生長調節劑對水稻細胞進行處理時,MeJA與ABA可誘導Osm30的表現,但是SA的處理則不影響。sm30的表現。此外,我們也在Osm30基因的起動子區域發現與JA和ABA相關的轉錄調控位。根據上述資料,我們推測Osm30為一具有幾丁質酶和溶菌酶雙重酵素活性的蛋白質,在水稻細胞內平常只有基礎量的表現,但當病原菌入侵時,可能經由JA或/和ABA啟動的訊息傳遞途徑來激發Osm30的表現,以強化植物的防禦機制。
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    水稻(Oryza Sativa L.) Osm34分泌性蛋白質的基因選殖及第三型幾丁質酶基因家族的親緣關係分析
    (國立臺灣師範大學生命科學學系, 2006-06-??) 李嘉雯; 王玉麒
    本研究從水稻細胞的培養液中,分離出一分子量為34kDa的分泌性蛋白質(Osm34),經由N端胺基酸微定序分析及基因選殖的結果顯示:不包含分泌訊息序列的Osm34 cDNA長度為1045bp,可轉譯出含有282個胺基酸,等電點為4.94的蛋白質。Osm34的胺基酸序列中,除了具有醣苷水解酵素第18家族成員所特有的兩個保守序列「104RVAVSMGG111」和「146LDGIDIDYE154」之外,胺基酸序列一致度(identity)的比對結果也顯示該蛋白質為一個由我們最先鑑定的水稻第III型幾丁質酶,我們已將其序列註冊於GenBank,編號為AF330230。水稻基因組資料庫中,共登錄有32個具保守序列的第III型幾丁質酶。我們對這些幾丁質酶進行多序列比對與親緣關係分析,結果顯示這些幾丁質酶可被分類至IIIa和IIIb兩個亞型(subc1asses)。III a亞型共包含有29個蛋白質,其胺基酸序列的一致度介於34-85%之間;IIIb亞型雖僅含有3個蛋白質,但其胺基酸序列的一致度高達50-83%;不同亞型之間,胺基酸序列的一致度則低於25%。由前人的研究(Bokma et al., 2002)得知,第III型幾丁質酶保守序列「DXXDXDXE」中的D和E為影響酵素活性的兩個關鍵胺基酸,但我們發現在IIIa亞型的29個幾丁質酶中,有20個成員的這兩個關鍵胺基酸發生變異,可能會導致酵素活性或受質專一性的改變。若將此一因素列入考量,我們建議將IIIa亞型幾丁質酶進一步區分為兩個次亞型(sub-subclasses),兩個關鍵胺基酸維持不變的九個成員為IIIa-1次亞型,而兩個關鍵胺基酸從D和E變異成F/Y和D的20個成員則為IIIa-2次亞型。如此,屬於III a-1次亞型的幾丁質酶彼此間胺基酸序列一致度也可提高到48-69%,而同屬IIIa-2次亞型內的幾丁質酶其胺基酸序列一致度則增加為43-85%。

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