Browsing by Author "高紹庭"

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    α-硫辛酸延緩脂多醣誘導庫氏細胞NLRP3發炎小體活化及庫氏細胞培養液誘發小鼠FL83B肝臟細胞胰島素阻抗之研究
    (2020) 高紹庭; Kao, Shao-Ting
    第二型糖尿病的主要病因為胰島素阻抗，造成身體周邊組織無法讓血液中之葡萄糖順利進入細胞氧化產能。文獻指出，糖尿病的成因與身體的氧化壓力有高度相關性。硫辛酸(α-lipoic acid, ALA)具有抗氧化、協助身體產能代謝及協助體內抗氧化物質之還原再生等功能。本研究欲探討硫辛酸對於給予脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)誘導不朽型小鼠庫氏細胞株(Immortal Kupffer cells)抗發炎及其改善庫氏細胞條件培養液誘發小鼠肝臟FL83B上皮細胞株胰島素阻抗之效果與可能機轉。庫氏細胞株先給予不同濃度(5, 100, 500, 2000μM)之ALA處理6小時後，再同時給予LPS 1μg/mL刺激6小時及nigericin 13.4μM 或ATP 1μM處理2小時增強發炎因子訊號，分析庫氏細胞發炎相關蛋白質表現量，並收集條件培養液進行後續實驗；其次，以庫氏細胞株條件培養液培養FL83B細胞株，並分析FL83B細胞胰島素阻抗相關蛋白質表現量。結果顯示，ALA濃度2400μM時庫氏細胞仍具有100%以上之存活率。而以LPS誘導庫氏細胞發炎之條件培養液其IL-1β產量與未誘導者相較提升了21.3倍，但是庫氏細胞株先給予ALA 2000μM處理再以LPS誘導後其IL-1β之產量降低了105倍。利用JC-1觀察ALA對LPS誘導庫氏細胞粒線體膜電位保護之效果，結果顯示ALA可以抑制LPS造成庫氏細胞粒線體膜電位失衡，並降低ROS對細胞之傷害。Western blot分析發現，ALA可以有效降低LPS誘導之庫氏細胞NF-κB、NLRP3蛋白之表現；另一方面，ALA可以明顯提升LPS處理庫氏細胞條件培養液培養FL83B細胞株胰島素傳訊蛋白p-PI3K、p-AKT及GLUT2之表現量。以上結果顯示，ALA可以減輕LPS誘導之庫氏細胞NLRP3發炎體活化，以及LPS誘導庫氏細胞條件培養液培養時FL83B細胞之胰島素阻抗。