學位論文
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Item 中鏈脂肪酸對痤瘡桿菌誘導發炎反應之影響(2014) 黃鈺涵尋常性痤瘡(acne vulgaris)又稱青春痘,除了好發於青春期男女外,在成年人也常見。其致病因子複雜,包括過多皮脂分泌(sebaceous hyperproductiom)、毛囊過度角化(follicular hyperkeratinization)、氧化壓力、發炎反應(periglandular dermal inflammation)和男性賀爾蒙都可能造成尋常性痤瘡的發生。痤瘡發展過程中痤瘡桿菌(P. acnes)被認為扮演重要的角色,P. acnes在阻塞的皮脂腺內大量繁殖會吸引單核球細胞(monocytes),而藉由活化單核球細胞與角質細胞的toll-like receptor,啟動其下游的訊息傳遞路徑使發炎介質產生而誘導痤瘡發炎;另外P. acnes誘發產生活性氧分子(ROS)也參與發炎反應。中鏈脂肪酸包括caproic acid (C6:0), caprylic acid (C8:0), capric acid (C10:0)和lauric acid (C12:0)。 本研究目的為:以THP-1細胞以及皮脂腺細胞SZ95,探討中鏈脂肪酸對於痤瘡桿菌誘導發炎反應的影響。capric acid於本實驗室先前的研究結果顯示可降低in vitro實驗中以P. acnes誘導THP-1 monocytes產生的促發炎激素IL-8, TNF-aIL-1B,而將P. acnes與capric acid注射進ICR小鼠耳朵的in vivo實驗結果顯示可以減少小鼠耳朵因P. acnes.造成的腫脹與重量。 以broth dilution method實驗的結果發現capric acid在高濃度時能抑制痤瘡桿菌生長;三種中鏈脂肪酸皆能夠減少P. acnes刺激THP-1 monocytes所產生的促發炎細胞激素TNF-a, IL-8,IL-1蛋白質和mR。 capric acid IC50為22.9 M,以capric acid作為後續機制探討的樣品,結果顯示capric acid在25, 50, 100 M,皆可以顯著降低p38, ERK, JNK, p65蛋白質磷酸化的表現;於in vivo抗發炎實驗中顯示,三種中鏈脂肪酸能夠抑制P. acnes誘發的發炎反應與耳朵腫脹現象。 另外,花生四烯酸(AA)會使P. acnes誘使THP-1產生的IL-8增加,且也同時增加皮脂腺脂質的堆積。capric acid則會降低單獨P.acnes和AA+P.acnes產生的IL-8;另外SZ95預處理AA後,AA+P.acnes組產生的IL-8高於單獨 AA 組別;capric acid會降低單獨P.acnes和AA+P.acnes產生的IL-8。Item 以痤瘡桿菌刺激單核球細胞為模式探討山苦瓜葉萃取物之區分物抑制IL-8生成(2016) 石雅欣; Shih, Ya-Hsin痤瘡桿菌(P. acnes),屬於革蘭氏陽性厭氧菌(gram-positive anaerobic bacterium),是存在人類皮膚毛囊、口腔、大腸、結膜的正常菌群之一,為尋常性痤瘡皮膚毛囊中的主要致病菌,也與眼內炎、心內膜炎、角膜炎、前列腺發炎癌化等發炎性疾病相關。痤瘡桿菌活化細胞膜上類鐸受體(TLR),啟動下游MyD88與MAPK等訊息傳遞,增加NF-κB與AP-1等轉錄因子活性,造成促發炎介質的生成。 苦瓜是常見的蔬菜,文獻指出苦瓜(Momordica charantia L.)具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗腫瘤、抗菌、抗發炎等作用,其活性成份也陸續被分離出來,像是類黃酮、酚酸、三萜、共軛次亞麻油酸等。先前研究指出,山苦瓜葉甲醇萃取物能夠抑制THP-1人類單核球細胞受痤瘡桿菌刺激之IL-8 (CXCL8)、TNF-α、IL-1β產生,並能降低細胞核內轉錄因子NF-κB,在動物實驗中亦能減緩ICR小鼠耳朵受痤瘡桿菌刺激所引起之紅腫發炎現象。 本篇研究分析山苦瓜葉之營養成分並接續分離山苦瓜葉甲醇萃取物,以抑制化學趨化激素IL-8為指標,希望找出具有抗發炎活性之山苦瓜葉區分物與成份。 實驗結果顯示,花蓮一號山苦瓜葉含有水份81.22%、粗蛋白6.26%、粗脂肪1.22%、粗纖維1.92%、灰份2.85%、維生素C 1920.14 μg/g drybasis。另外,山苦瓜葉甲醇萃取物之正已烷層區分物Hex-2m能夠顯著抑制痤瘡桿菌誘導之IL-8生成,抑制ERK、JNK、p38蛋白質磷酸化,並且能降低小鼠耳朵受痤瘡桿菌刺激所引起之紅腫發炎現象。透過化學呈色法、NMR、GC-FID、LC-MS分析出山苦瓜葉活性區分物Hex-2m中含有三萜類化合物,脂肪酸部分以α-次亞麻油酸(α-linolenic acid, C18:3 n-3)為主要成份。除此之外,GC-MS資料庫比對到squalene、phytol、維生素K1、維生素E (α-tocopherol、γ-tocopherol)、β-ionone與dihydroactinidiolide等化合物亦是活性區分物Hex-2m中之成份。