學位論文

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Subject: search.filters.subject.UV irradiation

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    山苦瓜萃取物抑制黑色素生成及抗光老化效應的評估
    (2011) 黃育亭; Yu-Ting Huang
    黑色素可保護皮膚免於紫外線傷害，但是過多的黑色素生成會造成黑色素沉澱形成色素斑塊。黑色素生合成主要受到酪胺酸酶(tyrosinase)調控。荷爾蒙、壓力和紫外線照射...等因素會促進黑色素生成。光老化(photoaging)為長期暴露在紫外線下造成皮膚提早老化的現象。紫外線誘導reactive oxygen species (ROS)的產生會提高皮膚中的氧化壓力、增加matrix metalloproteinases (MMP-1, collagenases)表現而降低皮膚中type I procollagen含量，亦促進cyclooxygenase (COX), PGE2和 nitric oxide (NO)等生成誘導發炎反應，導致皮膚乾燥形成皺紋。 苦瓜(bitter melon)或山苦瓜(wild bitter melon)的果實不僅當成蔬菜食用，也被認為具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗胃潰瘍、抗瘧、抗發炎及抗氧化等活性。在東南亞，苦瓜的葉子被用來煮汁治療皮膚病。 本研究以in vitro細胞模式評估台灣山苦瓜萃取物對於黑色素生成以及光老化的影響，再以in vivo人體試驗評估山苦瓜萃取物是否具有皮膚保健功效。 研究結果顯示，山苦瓜葉子甲醇萃取物具有良好清除自由基(DPPH, NO, superoxide, and hydroxyl radical)的能力。於in vitro細胞實驗模式中，山苦瓜葉子甲醇萃取物與果實乙酸乙酯萃取物可顯著抑制α-MSH刺激之B16-F10 melanoma細胞的黑色素生成與tyrosinase活性。另觀察UVB誘導人類角質細胞株(HaCaT)的ROS, MMP-1, and COX-2表現，山苦瓜果實萃取物(乙酸乙酯、乙醇、正己烷萃取物)、葉子(甲醇萃取物)或藤(甲醇萃取物)皆可以抑制UVB誘導HaCaT細胞的MMP-1與COX-2 mRNA表現。花蓮1號山苦瓜葉子甲醇萃取物與果實乙酸乙酯萃取物可以抑制UVB誘導HaCaT cells產生的ROS生成和MMP-1與COX-2 之mRNA與蛋白質表現。進一步探討其抑制作用機轉，發現UVB會顯著促進HaCaT cells ERK與JNK的磷酸化，而花蓮1號山苦瓜葉子甲醇萃取物與果實乙酸乙酯萃取物則能抑制此ERK磷酸化情形，故推測山苦瓜萃物經由抑制ROS生成、ERK的磷酸化而降低MMP-1表現。綜合細胞實驗結果，推測山苦瓜萃物應具有抑制黑色素生成與預防光老化的潛力。 另外招募29名受試者進行人體試驗，結果發現山苦瓜萃取物不會產生皮膚過敏或不適等症狀，具良好的外用安全性。而且塗抹含山苦瓜萃物乳霜於第8週、第12週均顯著改善斑點與細紋，與細胞實驗結果相符，故本研究已初步證實山苦瓜萃取物的皮膚保健功效。
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    探討苦瓜三萜類化合物對UVB刺激人類皮膚角質細胞的保護作用
    (2016) 鐘佩紋; Chong Pei Wen
    人體皮膚是保護身體抵抗外來傷害的第一道屏障，紫外線(UV) B（波長280-315 nm）能穿透皮膚表皮層(epidermis)，提高皮膚的氧化壓力與DNA損傷，誘導人類皮膚角質細胞(keratinocytes)產生發炎反應，導致皮膚光損傷(photodamage)及光老化(photoaging)。過度UVB曝露引起皮膚角質細胞大量凋亡而形成曬傷細胞(sunburn cells)可能導致皮膚癌。 山苦瓜(Momordica charantia L. var abbreviata Ser.)具有抗糖尿病、抗發炎、抗氧化、抗腫瘤、抗癌等藥理活性。本研究室先前研究發現山苦瓜葉甲醇粗萃物具有抑制酪胺酸酶活性、降低UVB誘導的活性氧物質等作用，因此本研究欲以細胞模式(cell-based assay)探討山苦瓜葉中三萜類化合物(triterpenoids)對於UVB刺激人類皮膚角質細胞（HaCaT細胞株）之保護作用。 本研究製備山苦瓜葉乙醇萃取物並取得5個區分物(fractions)，其中fraction 5對於UVB誘導HaCaT傷害具有良好的保護作用。自fraction 5純化得兩種葫蘆烷型(cucurbitane)三萜類化合物，分別為Kuguacin R和3, 7, 25-trihydroxycucurbita-5, 23-dien-19-al (TCD)。實驗結果證實Kuguacin R和TCD顯著提升UVB (20及30 mJ/cm2)照射後HaCaT細胞之存活率。兩種三萜類化合物都能顯著降低UVB誘導之細胞激素IL-1、IL-6、IL-8的生成，抑制MAPK蛋白質磷酸化與NF-κB活化，降低COX-2蛋白質含量並抑制PGE2生成，降低c-Jun蛋白質表現量，而TCD具顯著抑制c-Fos的能力，綜合以上結果，本研究顯示Kuguacin R和TCD具有抑制UVB誘導之發炎反應的功效。此外Kuguacin R和TCD具有抑制caspase-3活化及改善DNA斷裂的現象。另外in vitro經皮輸藥試驗確認Kuguacin R和TCD局部經皮吸收的能力。綜合上述結果，本研究推論Kuguacin R及TCD能減緩UVB造成的皮膚傷害，且有開發應用的潛力。