學位論文

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    生物活性導向分離鑑定山苦瓜葉抑制牙齦卟啉單胞菌誘導發炎反應的活性物質
    (2015) 洪雅菱; Hung, Ya-Ling
    牙齦卟啉單胞菌Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis)，為厭氧革蘭氏陰性菌，黑色、短桿狀，引起慢性牙周炎的致病菌之一。當宿主受到P. gingivalis感染，入侵口腔表皮細胞後，宿主將啟動免疫反應，刺激細胞激素、化學趨化素分泌，例如：介白素-8 (Interukin-8 ; IL-8)，誘導嗜中性白血球移動至發炎處浸潤，而產生了紅、腫的發炎現象。 山苦瓜（Momordica charantia L. var. abbreviate Seinge） 俱有多種功效，降血糖、降血脂、抗菌、抗發炎等功效。本研究室先前研究自苦瓜葉萃取物分離鑑定數種俱有抗發炎的活性物質，例如：beta-ionone, momordicoside aglycone等。 本研究以牙齦卟啉單胞菌（P. gingivalis）刺激人類單核球細胞（THP-1）細胞模式，以生成細胞激素介白素-8 (Interukin-8 ; IL-8)作為篩選指標。自山苦瓜葉萃取物分離並鑑定抗發炎活性的組成分：Charantadiol A ( 5β,19-epoxycucurbita-6,23(E),25(26)-triene-3β,19(R)-diol )—苦瓜二醇。細胞實驗結果顯示能夠抑制P. gingivalis 誘導THP-1細胞分泌IL-6、IL-8；而在動物實驗發現可抑制P. gingivalis 誘導小鼠牙齦組織IL-6和TNF-α mRNA表現。 本研究結果證實Charantadiol A俱有抗發炎的活性，故推測Charantadiol A俱有抑制牙周病炎和其他P. gingivalis 誘導發炎之相關疾病。
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    以痤瘡桿菌刺激單核球細胞為模式探討山苦瓜葉萃取物之區分物抑制IL-8生成
    (2016) 石雅欣; Shih, Ya-Hsin
    痤瘡桿菌(P. acnes)，屬於革蘭氏陽性厭氧菌(gram-positive anaerobic bacterium)，是存在人類皮膚毛囊、口腔、大腸、結膜的正常菌群之一，為尋常性痤瘡皮膚毛囊中的主要致病菌，也與眼內炎、心內膜炎、角膜炎、前列腺發炎癌化等發炎性疾病相關。痤瘡桿菌活化細胞膜上類鐸受體(TLR)，啟動下游MyD88與MAPK等訊息傳遞，增加NF-κB與AP-1等轉錄因子活性，造成促發炎介質的生成。 苦瓜是常見的蔬菜，文獻指出苦瓜(Momordica charantia L.)具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗腫瘤、抗菌、抗發炎等作用，其活性成份也陸續被分離出來，像是類黃酮、酚酸、三萜、共軛次亞麻油酸等。先前研究指出，山苦瓜葉甲醇萃取物能夠抑制THP-1人類單核球細胞受痤瘡桿菌刺激之IL-8 (CXCL8)、TNF-α、IL-1β產生，並能降低細胞核內轉錄因子NF-κB，在動物實驗中亦能減緩ICR小鼠耳朵受痤瘡桿菌刺激所引起之紅腫發炎現象。 本篇研究分析山苦瓜葉之營養成分並接續分離山苦瓜葉甲醇萃取物，以抑制化學趨化激素IL-8為指標，希望找出具有抗發炎活性之山苦瓜葉區分物與成份。 實驗結果顯示，花蓮一號山苦瓜葉含有水份81.22%、粗蛋白6.26%、粗脂肪1.22%、粗纖維1.92%、灰份2.85%、維生素C 1920.14 μg/g drybasis。另外，山苦瓜葉甲醇萃取物之正已烷層區分物Hex-2m能夠顯著抑制痤瘡桿菌誘導之IL-8生成，抑制ERK、JNK、p38蛋白質磷酸化，並且能降低小鼠耳朵受痤瘡桿菌刺激所引起之紅腫發炎現象。透過化學呈色法、NMR、GC-FID、LC-MS分析出山苦瓜葉活性區分物Hex-2m中含有三萜類化合物，脂肪酸部分以α-次亞麻油酸(α-linolenic acid, C18:3 n-3)為主要成份。除此之外，GC-MS資料庫比對到squalene、phytol、維生素K1、維生素E (α-tocopherol、γ-tocopherol)、β-ionone與dihydroactinidiolide等化合物亦是活性區分物Hex-2m中之成份。