第一型黏多醋儲積症

Abstract

本實驗在以分予生物的技術，進行第一型黏多酪儲積症(MPS I) 的基因突變及多型性分扣1 0 -il 先由正常人及患者的皮成纖維母細胞萃取t!~ poly(At RNA作為模板，用特殊序列的寡核甘眉之苦l 子及鼠類白血病毒(Mo-MLV)反轉錄酵素，合成和mRNA序列互補的第一鏈eDNA ，再用聚合酵素鏈反應(PC R) 將α-Liduronidase(IDUA)基因，以部份重疊的二片段選殖出來O 產入pGEM-T載體役，將篩退出的純系(clone) 進行DNA序列分析，手告比較正常人及患者的基因序列，來了解患者的分子病13J 0 志有W3 為其型合j'‘在1'+偽基因1 上，轉錄起始密碼ATG之G 突變為A ，而且第2 表現子的47個胺基酸片段，發生在l斗-解諸侯構的缺失。南方吸潰分析顯示患者拉因體DNA上，一個包含第二表此子的4.7 Kb 片段發生了缺失;在Jj-偽在~ Ii;] 2上，第193 個月安基放呈現多型性的變化，由妥胺酸(Met)轉變為異白fl安酸(Ile) ，而且第8 表現， of 也，~'， i/] 19 ii吐絨毛眉立片段，也發生在同一解讀架構的缺失。南方吸j責分析則顯示患者的IDUA 基因，三it 無相對港的缺失。相反的，患者W2 的IDUA eDNA ，貝I) 含有數種改變胺基酸的突變和多型性的變化，包Jli P;j 型合予的RI05Q A3 61T T364M V的41和異型今子的H240L F49 多L G549E 0 北方吸潰分析顯示，志者的纖維母細胞中，可偵測至I) 少量的2.3 Kb 及2.0 Kb mRNA 及大量的6 .4 Kb和3.9 Kb processed pre-mRNA 0 If!!.)訂peR ;，主限制片段長度多型性(RFLP) 或不同數目童提單位(VNτ'R.)的方法，我們對正常人及第一型黏多蹄f伊拉希拉忠衍，進行均-m I 及VNTR 多型性的封偽基因(allele)及草套型(haplotype)頻率的分析。此多型性的研究，或-'J 11/~ 的， J~LMPS 1檢視的參考。